DNA fastfaseekstraksjon Teknikker

fastfase-ekstraksjon ( SPE ) er en viktig komponent i molekylær biologi. Det tillater brukeren å skille DNA og RNA , som er de arvestoffet i livet , fra andre komponenter i en prøve . Dette er spesielt viktig fordi den praktiske anvendelsen av genetikk betyr at DNA og RNA ikke forekommer i naturen i en ren form , og SPE tillater brukeren å rense det for å studere den. Det finnes flere forskjellige typer av SPE . Vilkårene

Molekylærbiologi har et unikt vokabular som er viktig å forstå hvordan SPE fungerer . Fastfase-ekstraksjon er en generell teknikk hvor genetisk materiale er oppløst i en væske, kalles " mobile fase ", og føres gjennom et filter , den " stasjonære fase ". Filteret er spesielt utviklet for å tiltrekke seg uansett hvilken type molekyl er av interesse , men husk at i kjemi, motsatte ladninger tiltrekker hverandre . Brukeren sitter igjen med en væske som har passert gjennom filteret , og filteret i seg selv , som har fanget en viss partikkel . Det er viktig at observatøren vet om den ønskede forbindelsen kommer til å bli fanget opp av filteret eller ekskludert av det , slik at han vet hvor du finner den ønskede forbindelsen . Forskeren må ta i betraktning pH , polaritet og molekyl størrelse når du velger hva slags stasjonære og mobile faser for å bruke til å fange molekyl av interesse.
Normal fase SPE

den mest grunnleggende form av SPE , virker normal fase SPE akkurat som et filter hvor den ønskede molekyl er fanget på filteret . Den stasjonære fase er designet for å tiltrekke polare partikler , slik at en ikke-polar oppløsning blir brukt til å skylle den stasjonære fase av urenheter. Når observatøren er klar for den ønskede molekyl som skal vaskes av , er en polar løsning som brukes .
Reverse Phase SPE

Reverse Phase SPE skiller molekyler med deres polaritet. Denne metoden benyttes for ikke-polare eller svakt polaritet molekyler , siden den stasjonære fase er hydrofobe. Omvendt fase SPE er den minst selektiv av alle metodene som den beholder alt som er hydrofobe.
Anion Exchange- SPE

Anion Exchange- SPE er en av to ionebytte typer of SPE som utnytter forskjellene i spenning mellom filteret eller " sorbant " og molekyl av interesse. I tilfelle av anionbytter , er molekyl av interesse negativt ladet , slik som en syre . Dette molekylet er tiltrukket av den negative ladningen av den stasjonære fasen , og er fanget der.
Kationebytter SPE

kationebytter SPE fungerer akkurat motsatt fra Anion Exchange- SPE , i at filteret er negativt ladet for å fange molekylet av interesse som er positivt ladet . Immunoglobins , for eksempel, har en positiv ladning , og blir ofte tatt med Kasjon Exhange SPE .