Slik utfører Peroxidase Flekker

Påvisning av antistoffer er viktig for både laboratorieforskning og klinisk diagnostikk . Normalt antistoffer er usynlige . Hvis du ønsker å påvise antistoffer i et stykke vev , må du bruke en annen enn bare å se gjennom et mikroskop strategi . Alkalisk fosfatase- farging og peroksydase farging er to slike metoder. I peroxidase flekker , et enzym kalt peroxidase , som ligger i de antistoffer , brukes til å katalysere en kjemisk reaksjon , noe som resulterer i en farget membrane.Things du trenger
Naftol derivat ( 10 ml )
Benzidin - derivat løsning ( en flaske )
H3PO4 - Sitronbufferløsning( 200 ml )
Hydrogenperoksid ( 1 flaske )
Målesylinder
Mikropipette
Fosfat saltvann eller tris -bufret saltvann
Plastic skuffen på
Vis flere instruksjoner
en

Bland 10 ml naftolen derivatet og flaske benzidine - derivat løsning for å gjøre en flekker stamløsning .
2

Bland sammen 200 ml av H3PO4 - sitronsyre -buffer -løsning , og den flaske med hydrogenperoksid.
3

Plasser 50 ml av bufferoppløsningen til en 50 til 100 ml målesylinder.

4

Legg 2,5 ml av flekker lager løsning ved hjelp mikropipette og bland .
5

Plasser dette flekker løsning i et plastbrett .
6

Vask membran med saltoppløsning ( fosfat - buffret saltvann eller tris-bufret saltoppløsning) og dyppe det i farvestoffoppløsningen . La den trekke i mellom 10 minutter og en time .
7

Når bandet blir synlig , fjerner membranen og skyll den under rennende vann i 10 minutter for å stoppe reaksjonen .