Den Polymerase Chain Reaction , eller PCR er en teknikk som brukes til å lage kopier av DNA. Nærmere bestemt, bruker PCR et enzym kjent som en polymerase , som legger individuelle DNA-baser til en voksende kjede av DNA. PCR- reaksjonen er avhengig av de primere , korte tråder av DNA- polymerase er behov for å begynne å reprodusere DNA og primeren matriks , en blanding av reagenser og primerne selv. Hver PCR reaksjon bør være et samlet volum på ikke mer enn 50 uL.Things du trenger
10x PCR Buffer
2mM dNTP
50pmol primere
25 mM MgCl2
1 pmol mal DNA
Renset vann
Eppendorfrør på
Vis flere instruksjoner
1
Legg til 2,5 uL av PCR buffer til en Eppendorf rør , samt 2,5 uL av dNTPs .
2
Tilsett 2 pl ( 50 pmol ) av primerne til Eppendorf-rør og 1 ul av MgCl2 .
3
Legg vann for å oppnå et sluttvolum på 50 ul. Tilsett 1 pmol av templat DNA , eller 1 pl DNA- oppløsning , alt etter hva som er enklere å måle. Din primer matrise er forberedt.
4
Gjenta trinn 1 til 3 for så mange matriser som du ønsker å tilberede.
