Sett på lab utstyr ( frakk , hansker og vernebriller ) .
2
Bruk en mikropipette å legge 1,1 ml av en natriumklorid (salt ) og acetatbuffer løsningen inn en Eppendorf rør.
3
Sentrifuger lukket Eppendorf rør med salt løsningen inni den i ca fem minutter ved 13000 rpm. Husk å balansere den sentrifuger ved å plassere et Eppendorf-rør inneholdende 1,1 ml vann over fra og motsatt til saltløsningenrøret.
4
Tilsett 1 ml av saltløsningtil en brønn i en 24 -brønns plate .
5
Bruk fettfylt sprøyte til å plassere et tynt lag av fett rundt kanten av denne brønnen. Pass på å ikke legge for lite eller for mye. Hvis du legger for mye fett , vil fettet renne ned i brønnen og muligens ødelegge eksperimentet. Hvis du bruker for lite , vil vel ikke være lufttett og eksperimentet vil ikke fungere . Målet for akkurat nok fett som dekkglass og fett danner en lufttett forsegling senere.
6
Rull leire med hendene for å lage fire små kuler , og presse dem inn på de fire hjørnene av 24- brønns plate . De vil fungere som støtte for å sikre dekning av platen ikke kommer i kontakt med dekkglass .
7
Bruk trykkluft for å blåse støv ut av dekkglass . Hold dekkglass med et par rene pinsett.
8
Suck opp 4 mikroliter av lysozym løsning med din mikropipette , og legge denne løsningen til sentrum av dekkglass . Endre pipetter , og legge til 4 mikroliter av saltløsning . Forsiktig pipettere opp og ned, suger inn fluidet og deretter fjerne det , for å blande saltløsningmed lysozym -løsning . Vær nøye med å blande de to uten å spre væsken over hele dekkglass .
9
Slå dekkglass over raskt , slik at væsken ikke glir av, og plante den holdent oppå også. Vær nøye med å trykke forsiktig på den slik at den danner en lufttett forsegling med fett rundt kantene av brønnen.
10
Skyv dekselet på 24-brønns plate på leire baller , og la platen på et kjølig sted .