" Syre lysekthet " refererer til en bestemt fysisk egenskap av visse bakterier , nemlig deres evne til å motstå syre bleiking under fargingsprosedyrer . Disse resistente organismer er kalt " syrefaste organismer ", og kan bare være farget for visningsformålved hjelp av syre -fast flekker . Det er tre primære flekker benyttet med hell for farging syrefasteorganismer : den Ziehl - Neelsen flekk ; den Kinyoun metoden; og enkelte fluorescerende fargestoffer
Ziehl - Neelsen Farging
Ziehl - . Neelsen flekken er en spesiell bakteriologisk beis som brukes til å vise syrefaste organismer , primært Mycobacteria . Syrefaste organismer som er farget ved hjelp av Ziehl - Neelsen flekken blir rød . Fremgangsmåten for Ziehl - Neelsen farging er som følger:
1 . Dekk med silkepapir (valgfritt).
2 . Dekker objektglass med carbolfuchsin , den primære flekk , i 3 til 5 minutter under oppvarming med damp eller oppvarming på en Bunsen -brenner.
3 . Fjern silkepapir hvis brukt , decolorize lysbilde ved hjelp av en blanding av etanol og saltsyre. "
4 . Counterstain bruker malakittgrønt eller metylenblått .
Kinyoun Farging
Kinyoun flekken er en annen metode som brukes i farging syrefaste mikroorganismer. den er lik den Ziehl - Neelsen flekken, med den primære forskjellen er at du ikke varme opp lysbildet når du søker Kinyoun flekker . Underneath et mikroskop , vil farget organismer vises blå prosedyren for å søke Kinyoun flekker er som følger : . .
1. Dekk lysbilder med Kinyoun carbolfuchsin i 5 minutter og skyll med vann til den løsner klart
2 Dekk lysbilder med syre alkohol - 3 prosent HCl i etanol - 3 minutter og skyll igjen med vann til den løsner klart
3 Dekk lysbilder med metylenblå fargestoff i 3 minutter og . . skyll forsiktig med vann til den løsner klart.
4 La lysbilder lufttørke før visning. .
Auramine - Rhodamine Farging
auramin -rhodamine flekken , noen ganger kalt Truant auramin - rodamin flekken , er en teknikk som brukes for å vise syrefaste mikroorganismer ved hjelp av fluorescens mikroskopi. Når spesifikke forbindelser er belyst ved hjelp av høy - energilampe , har de en tendens til å sende ut en annen , lavere frekvens lys som et resultat av eksponering. Dette kalles fluorescens. Syrefaste mikroorganismer avgir en rødlig -gul fluorescens med denne metoden. Den auramin - rodamin flekken er kanskje ikke så spesifikk for syrefaste organismer som de Ziehl - Neelsen eller Kinyoun flekker , men det er mer rimelig og er ofte brukt som et screeningverktøy .