Hvordan å bestemme konsentrasjonen av Paracetamol i en prøve

Paracetamol eller paracetamol , er en vanlig over-the -counter smertestillende som finnes i legemidler som Tylenol . Du kan bestemme konsentrasjonen av paracetamol i en prøve med en rekke metoder . Den ene mest praktisk for deg, avhenger av hva slags prøven og graden av følsomhet og presisjon du trenger. En av mange mulige tilnærminger innebærer spectrophotometry - skinner lys av en bestemt bølgelengde gjennom prøven og bruke absorbans å finne ut hvor mye paracetamol var til stede . Metoden som beskrives her ble rapportert i "Journal of Food and Drug Analysis" i 2008.Things du trenger arkiv hansker , vernebriller og frakk ( sette disse på før du begynner ) arkiv Kalibrert mikropipette med engangs plast tips
4 prosent kobber (II) sulfat i vann ( reagens C)
reagensrør og reagensrørstativ
4 prosent bicinchoninic syre ( BCA ) i vann ( reagens B)
Parafilm
Etylacetat
Avtrekkskap
Natriumklorid
Slikkepott
Pasteur pipetter med gummi pære
Standard løsning av paracetamol med kjent konsentrasjon
Cuvette
spektrofotometer
Vis flere instruksjoner

1

Mål opp 200 mikroliter reagent C med mikropipette og legge den til et rent reagensrør . Måle ut fem milliliter reagent B , legge dem til i reagensglass og virvle forsiktig for å blande .
2

Dekk reagensrør med Parafilm og behold den til senere bruk.

3

Pipetter 0,5 ml av ukjent inn i en annen reagensrør.
4

Overfør reagensglass til avtrekkshette.
5

Legg til en milliliter av etylacetat til det ukjente , etterfulgt av noen få krystaller av natriumklorid. Cap reagensglass og rist den kraftig i 30 sekunder for å blande innholdet , være sikker på å holde tommelen på hetten til enhver tid som du gjør det . Umiddelbart etterpå , fjerne hetten for å slippe noe press , så oppsummering røret.
6

Tillat innholdet i røret for å dele inn i to lag. Etylacetat er mindre tett , og dermed vil danne det øvre lag eller "organisk fase. " Tilsett 2 ml av løsningen du forberedt i trinn 1 til en annen ren reagensrør .
7

Bruke en av dine Pasteur pipetter , nøye overføre det nederste laget til et rent reagensrør , og deretter overføre den organiske laget til røret inneholdende 2 ml av blandet reagens. Ta dette røret og snurr den forsiktig eller cap det og virvle det å blande. La det stå ved romtemperatur i fem minutter .
8

Ta en ren kyvette og tilsett 1 ml deionisert vann . Plasser den i spektrofotometer og bruke det som en tomt for å korrigere spektrofotometer lesing. De nøyaktige instruksjoner å følge for bruk av spektrofotometer vil avhenge av produsenten . Se deres retningslinjer for detaljer.
9

Rens kyvetten og tørk den grundig (eller bruke en annen ren kyvette ) og legge noen av dine blandet reagens til en ren kyvette til du kommer til full 1 ml merket . Plasser kyvetten i spektrofotometer og måle absorbans .
10

Tilsett 1 ml av standardløsningen til en ren kyvette (enten rent og tørk det gamle, eller bruke en ny) , deretter teste den i kyvetten og registrere sin absorbans .
11 <​​p> Tilsett 1 ml din ukjent for en ren kyvette , plasser den i spektrofotometer og måle absorbans .
12

Trekk absorbansen av reagenset blandingen tomme fra absorbansen av det ukjente. Gjør det samme for standard .
13

dele resultatet for det ukjente med resultatet for standarden , deretter multiplisere med konsentrasjonen av paracetamol i standarden. Dette vil gi deg din paracetamol konsentrasjon.