Slik Pour Gradient Gels

A gradient gel er en blanding av to konsentrasjoner av akrylamid gel som helles på en slik måte at de skaper en jevn overgang fra en høy konsentrasjon av acrylamid på bunnen til en lettere konsentrasjon på toppen. De er som regel pumpet inn kassetter som sandwich gelen mellom to glassruter . Gradientgel kassetter brukes i laboratoriet for å bestemme protein vekter og migrasjons egenskaper tunge organiske molecules.Things du trenger
Gel kassett
to - kammer gradient maker
Røring stå arkiv to røre barer
Gradient gel løsning
ammoniumpersulfat ( APS )
Tetramethylethylene diamin ( TEMED )
Vann mettet n - Butanol på
Vis flere instruksjoner
Sette opp Apparatus

1.

Monter gel kassetten i henhold til produsentens instruksjoner , slik at bunnen av kassetten er helt forseglet .
to

Plasser gradient maker på en røre stand på et nivå høyere enn toppen av kassetten. Plasser en rørepinne i hvert kammer . Lukk alle utsalgssteder og plassere utløpsrøreti toppen av kassetten slik gelen vil strømme inn i toppen midten av kassetten .
3

Fyll nonoutlet sylinder på graderingen maker med en gel -løsning blandes til den lavest ønskede konsentrasjon . Åpne vannkranen mellom de to sylindere for å tømme ut eventuelle luftboblerog lukke vannkranen . Fyll utløpssylinder med gel løsning blandet til det høyeste ønsket konsentrasjon .
Helle Gel
4

Mix 1 ml APS og 0,1 ml TMED per 100 ml gradient gel i hver sylinder .
5

Åpne vannkranen mellom sylindrene . Åpne utløp til en strømningshastighet som vil tømme sylindrene i 5-8 minutter. Rør innholdet i uttaket sylinder hele tiden til begge sylindrene er helt utladet .
6

Overlegg gel med vann mettet n - Butanol .