Sikre bruk av en ren , steril laboratoriet plass til å gjennomføre Gram flekken test. Bruk rene lab klær og sko gulvbelegg for å hindre forurensning . Bruk hansker og maske ved håndtering av bakteriekulturer . Isolere en koloni av basiller for din test og vokser det ut på næringsrik agar i petriskåler . Sterilisere petriskåler og agar med en trykkoker før bruk .
To
Tilsett noen dråper rent vann til kultur parabolen. Fordel den jevnt over agar . Dra en innsprøytning sløyfe lett over agar overflate. Overfør prøven på et rent glass lysbilde og smøre det jevnt i sirkulært område på størrelse med en krone . Hold størrelsen på utvalget minimal ; du bør være knapt i stand til å se det med det blotte øye .
3
Påfør 95 prosent metanol over glide smøre for to minutter å fikse cellene og forhindrer forvrengning av deres morfologi . Air tørke lysbildet eller varme den forsiktig over en lav Bunsen brenner flammen . Flytt glide back- og-tilbake for å varme jevnt og unngå lokale hot spots . Påfør varmen jevnt og konsekvent . Unngå å ta raset ut av flammen før du er ferdig med å varme den .
4
Hell krystallfiolett flekken reagens over fast lysbilde. La det stå i 30 til 60 sekunder . Vask flekken med vann fra springen i noen få sekunder . Drenere overflødig vann fra raset . Dekk lysbilde med jod flekken reagens i 30 til 60 sekunder . Vask av jod med vann fra springen . Vipp sklie og tilsett noen dråper decolorizer . Bruk den til avrenning er ren . Vask raset .
5
Sug lysbildet med rosa -farget safranin mot flekker reagens for 30 sekunder . Du kan erstatte grunnleggende fuksin løsning for safranin . Forsiktig vaske raset og riste av overflødig vann . Blot den tørr med absorberende papir og deretter luft - tørke lysbildet . Undersøk forberedt skyve under et mikroskop utstyrt med en lyskilde . Se etter og identifisere gram positive bakterier stenger med blå eller fiolett farge fra Gram flekken test .