Kolonne Verifisering Teknikker i HPLC

Høy ytelse væskekromatografi ( HPLC ) er et verdifullt verktøy for moderne organiske kjemikere , fordi det gjør det mulig ikke bare å separere en blanding i sine komponenter , men også å kvantifisere hvor mye av hver er til stede. Selv HPLC enheter er avanserte instrumenter , kan resultatene deres gradvis forringes over tid . For å sikre at de fungerer som de skal og leverer pålitelige resultater , er det viktig å kontrollere resultatene deres med jevne mellomrom. Flow Rate & Trykk

Pumpen må være i stand til å opprettholde nøyaktige strømningshastigheter . Testing av strømningshastigheten er ganske enkel og bare innebærer å måle den tiden det tar å samle inn en vilkårlig valgt mengde av løsningsmiddel fra kolonnen ved forskjellige innstillinger av strømningshastigheten . Pumpetrykk kan testes ved å koble pumpeutløpet med en dead- mutter og koble en opptaker til å måle pumpe -head press . Trykket skal øke raskt til ca 3000 pounds per kvadrattomme ( PSI ) , deretter øke mer gradvis til et høyere trykk , noe som medførte at pumpen vil automatisk slå seg av. Hvis trykket svinger på 3000 PSI eller avtar raskt etter at pumpen slår seg av , som regel innebærer det en feil , som en lekkasje i systemet .
Gradient

Pumpen må også være i stand til å nøyaktig variere sammensetningen av det løsningsmiddel eller den mobile fase , for derved eluering eller spyling fra kolonnen stadig mer upolare forbindelser som prosentandelen av de mindre polare oppløsningsmiddel øker. Gradient nøyaktighet er testet ved hjelp av to kanaler på en gang , en av dem som gir rene oppløsningsmiddel og det andre oppløsningsmiddel med en oppløst kjemisk tracer , som koffein . Som konsentrasjonen av de andre løsnings øker, kan du måle ultrafiolett ( UV ) absorbans utgang for kolonne og bruke disse dataene til å kontrollere gradient nøyaktighet .
Injector Module

injektor modulens presisjon kan testes ved å utføre seks replikatmålinger injeksjoner med en enkelt prøve ; betydelige avvik i resultatene foreslår at du har et problem . Noen eksperimenter omfatter variable injeksjonsvolum , slik det er også viktig å teste injektoren evne til å trekke den riktige mengde av prøven. Ved å gjennomføre injeksjoner over 0 til 100 mikroliter rekkevidde, kan en kjemiker innhente og plotte data og bestemme sammenhengen mellom resultater og prøven konsentrasjon . En svak sammenheng antyder en funksjonsfeil .
Detector Module

Detektoren modul poster absorbans for oppløst stoff og væske éluerende eller strømmer fra bunnen av kolonnen , slik at nøyaktigheten er spesielt kritisk for å sikre gode resultater . Mange HPLC instrumenter omfatter innebygde bølgelengde verifisering kapasitet til å sikre bølgelengde detektoren brukes er den samme som den som er merket . En annen test innebærer bruk av en serie prøver som inneholder en økende konsentrasjon av en forbindelse som koffein . Kjemikeren kan deretter plotte resultatene versus test -løsning konsentrasjon på og bestemme styrken av sammenhengen . En svak sammenheng antyder en funksjonsfeil .

Hobbyer, spill © (www.northgames.biz)