Hell din cellekulturmedium inn i et stort beger og plasser begeret på en mekanisk røreverk. Vispen blander mediet under sletting av nitrogen stream . Ved hjelp av denne fremgangsmåten vil tillate en sammensetning av en stor mengde medium for å opprettholde mer ensartet sammensetning .
2
påføre en spyling med røret til utgangen av en nitrogentank . En spyling med slange er sammensatt av et glassrør med en bærer av sintret glass spiss inkorporert inn i enden av røret. Den åpne ende av røret er festet til en lengde av plastrøret som er koblet til en nitrogentankgir en strøm av nitrogen som det kommer ut av bærer av sintret glass ende av røret av mange strømmer av små gassbobler .
3.
Plasser bærer av sintret glass ende av spyling røret i bunnen av begerglasset , og slå på blanderen. Sett rørehastighetpå mekanisk rører for å gi jevn blanding av mediet .
4
Slå på strømmen av nitrogen på tanken og tillate den å boble inn i mediet . Nitrogenet vil mette medium med nitrogenet som den er oppløst. Hver væske besitter en begrenset løselighet av forskjellige gasser. Ettersom nitrogen oppløses i mediet , er andre oppløste gasser støtes ut fra mediet. Purging fjerner gasser så som oksygen og karbondioksyd fra dyrkningsmediet .
5
tillate den nitrogenstrøm til å boble i minst 15 minutter for å mette mediet , avhengig av strømningshastigheten for gassen. Når fyllingen av medium er ferdig, fjerner du bærer av sintret glassrøret fra begeret og overføre renset cellekulturmedium til en lukket beholder, og oppbevar den i kjøleskapet . Den reduserte temperaturen i kjøleskapet vil redusere graden på hvilke gasser oppløses i mediet under lagring .